在实验室批量样品处理工作中,12 道移液器是常用的移液器具,多通道同步移液的工作模式能够提升样品处理效率,但在长期使用过程中,移液误差偏大的现象时常出现。误差会直接干扰实验结果的准确性,影响后续实验数据的可信度。想要解决该问题,需要从设备硬件状态、耗材匹配、人员操作等多个方面开展排查,重点针对密封老化问题与操作手法带来的干扰制定对应的处理办法,逐步还原移液器正常的移液性能。
开展误差排查工作时,应当遵循由外到内、由简单到复杂的顺序,先排除环境与耗材带来的影响,再检查设备本体状态,最后核对操作流程。首先需要确认实验环境条件,环境温度发生波动,会改变液体体积,也会对移液器内部构件产生影响,实验操作尽量保持环境温度稳定,避免移液器长时间放置在温度变化明显的区域。同时检查移液枪头的适配情况,枪头与移液器吸头座匹配度不足,会出现装配松动、贴合不紧密的情况,造成移液过程出现漏液,引发移液数值偏差。选用规格不匹配的枪头,会进一步放大移液误差,更换适配的原厂枪头后,观察移液状态是否得到改善。
完成耗材与环境排查后,重点排查密封部件老化问题。12 道移液器依靠内部密封组件实现腔体密闭,依靠密封效果完成液体的吸入与排出。经过反复按压、长期接触各类试剂,密封圈会出现磨损、变硬、开裂、变形等老化现象。密封出现问题之后,通道内部无法维持稳定负压,吸液阶段会出现吸液量不足,排液阶段会出现液体残留,各个通道之间移液量出现不一致,整体移液误差上升。
判断密封是否老化,可以进行简易的静态检漏测试。将移液器装配好枪头,吸取一定体积液体,保持竖直状态静置片刻,观察枪头端口是否有液体缓慢滴落。如果出现滴液现象,说明密封性能下降。部分移液器个别通道出现漏液,其余通道状态正常,也属于密封老化的典型表现。针对密封老化的处理,不可继续带病使用移液器。可以拆卸移液器对应通道,更换全新的密封圈,更换过程中保持部件洁净,不要沾染灰尘、试剂残留。更换完成后,需要对移液器进行试移液,确认各个通道不再出现漏液情况。日常使用中,尽量避免移液器吸取具有腐蚀性、强有机溶剂类液体,这类试剂会加速密封件损耗,接触腐蚀性液体后,需要及时对移液器内部进行清洁养护,延缓密封部件老化速度。
除硬件密封问题以外,操作手法带来的干扰,也是造成 12 道移液器移液误差偏大的常见因素,很多时候设备硬件完好,却因为操作习惯问题产生偏差。第一是按压档位把控不到位,移液器分为吸液档位与排液档位,部分操作人员操作时直接按压至第二档完成吸液,会造成吸入液体体积超出预设数值。正确做法是吸液时按压至第一档位,松开推杆完成吸液,排液时按压至第一档,再继续下压完成残留液体排出。第二是移液时枪头浸入液体深度不当,枪头浸入过深,会带入额外液体;浸入过浅,容易吸入空气,造成吸液量不足。操作时枪头jian端浸入液面下少量即可,保持移液器竖直,不要倾斜角度过大。
第三是吸排液的速度把控,快速按压释放推杆,会造成液体产生气泡,气泡留存枪头内部,直接改变实际移液体积。操作过程中推杆下压、回弹都需要保持平缓,避免动作过快产生气泡。第四是移液器放置方式不当,操作间隙将移液器平放,枪头内残留液体容易回流进入移液器内部,腐蚀内部密封构件,同时也会造成下一次移液出现误差,不用的时候应当将移液器竖直悬挂放置。
还有部分人员在移液完成后,直接将枪头用力甩落,剧烈震动会造成移液器内部构件位置偏移,间接放大移液误差,卸除枪头应当使用枪头弹射装置,不要用力磕碰枪头座。
完成硬件检修与操作习惯调整之后,需要开展验证工作。选取合适的液体,多次重复移液操作,对比各通道移液结果,观察误差是否回落。在日常工作中,也要做好定期维护,定时检查密封组件状态,规范操作流程,减少因为硬件损耗与人为操作带来的移液偏差,保障批量移液工作可以稳定开展。